在前面提到，將等式同時取對數，并簡化就可以得到： 或者這就是Henderson-Hasselbalch方程。值得注意的是，式子中酸及其共軛堿的濃度都是平衡時的濃度，除了酸性過于強的情況下，由于同離子效應的存在，一般都可用此式計算，根據此式可得出下列幾點結論：1 緩沖液的pH值與該酸的電離平衡常數Ka及鹽和酸的濃度有關。弱酸的pKa值衡定，但酸和鹽的比例不同時，就會得到不同的pH值。酸和鹽濃度相等時，溶液的pH值與PKa值相同。2 酸和鹽濃度等比例增減時，溶液的pH值不變。3 酸和鹽濃度相等時，緩沖液的緩沖效率為比較高，比例相差越大，緩沖效率越低，緩沖液的一般有效緩沖范圍為pH=pKa±1,pOH=pKb±1。 [1]在?酶活性實驗中，?緩沖液的主要作用是?維持實驗環境的pH穩定?。海南PBS緩沖液

生化實驗中加入緩沖液的目的和作用生物緩沖液是一種能夠保持pH值不受酸堿度影響的溶液，多種細胞只能在很小的PH范圍內活動，需要有緩沖體系來維持整個過程不受干擾。尤其是在生化實驗中，生物緩沖液極其受重視，因為實驗中的各類物質非常容易使PH發生變化，而這就直接影響到整體工作進程。例如在酶活性實驗中，有時因為PH的變化大，會使酶活性下降甚至失活，導致實驗無法進行下去，所以在生化實驗中加入緩沖液的主要目的就是維持PH的穩定。西藏有酚紅緩沖液價格信息為了避免PBS緩沖液對人體的負面影響,建議使用時遵循正確的使用方法和容器規格,避免長時間或過量使用。

做ELISA確定抗原**佳包被濃度，做方陣滴定具體怎么做呢？選擇好一份已知為陽性和陰性背景的標本，將你的抗原用1*CBPH=*PBPH=（8個條件）后加入96孔板每孔100ul。（一般包被濃度100ng抗原或抗體/孔，**優包被條件需進行試驗選擇）4度過夜取出后甩干，加入20%NBS封閉每孔200ul。37度2h熱封，甩去后拍干即可。將你HRP或AP標記的抗原或二抗用酶標稀釋液進行稀釋（倍比稀釋4個梯度）即可。棋盤滴定就是板酶交叉,同時帶上陽性、陰性通過試驗確定**佳P/N的包被搭配E的試驗2．抗原和抗體**佳工作濃度的確定?抗原抗體反應要求在**適比例條件下進行，ELISA反應試劑多，其工作濃度不同對結果影響較大，因此必須對包被抗原(抗體)和酶標抗體(抗原)進行**佳工作濃度的滴定和選擇，以達到**佳的測定條件。?1）方陣(棋盤)滴定法選擇包被抗原的工作濃度用包被液將抗原作一系列稀釋。

緩沖液的作用和使用注意事項

一、緩沖液的概念緩沖液（Buffersolution）通常是由弱酸及其共軛堿或弱堿及其共軛酸緩沖對所組成的溶液，能夠在加入一定量其他物質時減緩pH的改變。以生物實驗中**常用的一種緩沖液PBS為例，是由Na2HPO4、KH2PO4組成的緩沖對，在PH5.8-8.0范圍內有較強的緩沖能力。二、緩沖液的作用緩沖溶液的作用是在有限的范圍內調整溶液的pH值，使待測溶液的酸度符合分析方法所規定的范圍。例如，苯酚在堿性介質及鐵**鉀存在下，可與4-氨基安替比林反應生成橙紅色的安替比林染料，為了防止芳香胺類的干擾以pH在10士0.2時**為適宜。為此，就需要在待測溶液中加入氨一氯化錢緩沖溶液調整和控制待測溶液的pH為10.0士0.2。 緩沖溶液的作用是在有限的范圍內調整溶液的pH值，使待測溶液的酸度符合分析方法所規定的范圍。

    1:50～l:800)后，按行進行包被、洗滌。按列分別加入用稀釋液1:100稀釋的強陽性、弱陽性、陰性參考血清及稀釋液(作空白對照)，保溫，洗滌。加工作濃度酶標抗體，洗滌，加底物顯色，加酸終止反應后讀取A值。選擇強陽性參考血清A值；為0．8左右，陰性參考血清A值<0．1的包被抗原稀釋度為工作濃度。?方陣(棋盤)法選擇包被抗體和酶標抗體的工作濃度將抗體用包被液稀釋為10mg／L、lmg／L、／L三個濃度按行包被，每一個濃度包被三行(每行3孔)，分別在每個濃度包被的***、二、三行中分別加入強陽性抗原，弱陽性抗原和陰性對照，將酶標抗抗體用稀釋液稀釋為1:l000、l:5000、l:10000三個濃度，分別加入每個濃度包被的***、二、三列中。加底物顯色，加酸終止反應，分別讀取A值。以強陽性抗原液A值在，陰性參考A值<**適條件。據此選擇包被抗體和酶標抗體的**佳工作濃度。?二、ELISA**適工作濃度的選擇及標準化操作1**適工作濃度的選擇?1．1間接法測抗體?????酶標抗體工作濃度的選擇：①用IgG進行包被，洗滌。②將酶標IgG用稀釋液作一系列稀釋后分別加入已包被的孔中，保溫、洗滌。③加酸終止反應后，讀取吸光度(A)。讀取A值在1．0時的酶標抗體稀釋度，作為酶標抗體的工作濃度。長時間或過量使用PBS緩沖液可能會對人體產生耐受性,導致惡心、嘔吐、腹瀉等癥狀。西藏有酚紅緩沖液價格信息

在生物化學研究中,為什么要使用緩沖液?在使用緩沖液時應注意那些問題?海南PBS緩沖液

緩沖溶液的pH通常由酸的電離平衡常數Ka及鹽和酸的濃度以及所在的環境、溫度等因素來決定；4.75~7.25屬于正常ph范圍內。緩沖溶液是由弱酸及其鹽、弱堿及其鹽組成的混合溶液，能在一定程度上抵消、減輕外加強酸或強堿對溶液酸堿度的影響，從而保持溶液的pH值相對穩定。緩沖溶液的pH值在一定的范圍內不因稀釋或外加少量的酸或堿而發生***的變化，緩沖溶液依據共軛酸堿對及其物質的量不同而具有不同的pH值和緩沖容量。1、酸和鹽濃度等比例增減時，溶液的pH值不變。2、酸和鹽濃度相等時，緩沖液的緩沖效率為比較高，比例相差越大，緩沖效率越低。海南PBS緩沖液