2024-11-28 02:09:33
(二)Hanks平衡鹽溶液(Hanksbalancedsaltsolutions,HBSS)為了便于保存和減少有關成分的化學反應,此液可配成20倍濃縮液(20×),10倍濃縮液(10×)和5倍濃縮液(5×)的儲存液(母液)。現以l0×為例,將其配制方法介紹如下:×母液配制法甲液:取450ml三蒸水依次溶解下列試劑NaCl80gKCl4gMgS04·(含2H20者)待完全溶解后,補足三蒸水至500m1。乙液:取450m1三蒸水依次溶解下列試劑(含12H2O者),補足三蒸水至500ml。、乙液等量用三蒸水稀釋10倍,即成使用液。用前高壓滅菌。例如配制1000m1Hanks使用液,則取三蒸水900ml加入甲液50m1、乙液50m1混勻,用(115℃)高壓滅菌15分鐘。臨用時,用。3.無鈣鎂Hanks(calciumandmagnesiumfreeHanksbufferedsaline,CMF-Hanks)液,也稱D-Hanks液。D-Hanks與Hanks液的一個主要區別是前者不含鈣和鎂,常用于配制胰蛋白酶等溶液;而Hanks液*含,不能用于5%C02的環境,若放于C02孵箱中,溶液將迅速變酸,使用時應注意D-Hanks與Hanks液的這些區別。【附】:為配制上述Hanks液,應先配好。配制方法如下:稱取,置玻璃研缽中細研,逐漸加入,要記好加NaOH的量,共加至,將研好的酚磺酞液用吸管移入燒瓶中加三蒸水(113℃)高壓滅菌15分鐘。 平衡鹽溶液維持 體外細胞結構和生理完整性。甘肅EBSS平衡鹽溶液包括什么
PBS液 可配成含0.85%NaCl,pH 7.2的PBS(簡稱pH 7.2 PBS)。 1. PBS儲藏液(10×)配法 NaCl 8.5g KCl 0.2g Na2HP04·12H20 2.85g(或Na2HP04·2H20 1.13g) KH2P04 0.27g 溶于100ml雙蒸水中。 2. PBS應用液配法取儲藏液 50ml加雙蒸水450m1即成,經103kPa(121.3℃) 15分鐘滅菌,置室溫或4℃保存備用。 除上述三種常用的平衡鹽溶液外,尚有其他幾種次常用的平衡鹽溶液,如低鈣鎂的Dul-becc。液和無鈣鎂的D-Hanks液(或CMF-Hanks)等。可用于配制消化液和洗滌細胞(可防止抑制酶活性和致細胞凝結等)。其成分見表1-5,配制辦法可參照上述幾種平衡鹽溶液的辦法舉行。江蘇DPBS平衡鹽溶液包括什么平衡鹽溶液它是生物化學研究中使用一種緩沖液。
PBS緩沖液的保存方法:加去離子水約800mL充分攪拌溶解,然后加入濃鹽酸調pH至,**后定容到1L。高溫高壓滅菌后置于4攝氏度冰箱保存待用。PBS緩沖液一般作為溶劑,起溶解保護試劑的作用,具體試劑一般也有不同的比例配方,在針對性上就有了更好的效果。1xPBS緩沖液就是。2xPBS就是2倍濃度,使用時稀釋一倍使用。。PBS緩沖液的作用:不僅偽要用它稀釋,一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋。原因就是它具有鹽平衡、可調整的適宜pH緩沖作用,蒸餾水不具有鹽平衡作用,可以破壞生物蛋白的結構及生物特性;生理鹽水不具有調整pH的作用,對完整的、具有活性的物質不能保證其在**適條件下參與生物反應,所以使用PBS是***個選擇。PBS也不是都能用的,有的生物活性物質需要的條件比PBS還要高,就需要在平衡緩沖液中加入更多的成分,維持**佳的條件保證生物活性物質保持其**完整的特性。
(四)PBS液可配成含0.85%NaCl,pH7.2的PBS(簡稱pH7.2PBS)。1.PBS貯存液(10×)配法NaCl8.5gKCl0.2gNa2HP04·12H202.85g(或Na2HP04·2H201.13g)KH2P040.27g溶于100ml雙蒸水中。2.PBS應用液配法取貯存液50ml加雙蒸水450m1即成,經103kPa(121.3℃)15分鐘滅菌,置室溫或4℃保存備用。除上述三種常用的平衡鹽溶液外,尚有其他幾種次常用的平衡鹽溶液,如低鈣鎂的Dul-becc。液和無鈣鎂的D-Hanks液(或CMF-Hanks)等。可用于配制消化液和洗滌細胞(可防止抑制酶活性和致細胞凝聚等)。其成分見表1-5,配制方法可參照上述幾種平衡鹽溶液的方法進行。平衡鹽溶液滿足體外實驗中細胞生存并維持一定的代謝的基本需要。
細胞培養常用水和平衡鹽溶液的配制方法:水是細胞賴以生存的主要環境,營養物質和代謝產物都必須溶解在水中,才能為細胞吸收和排泄。而且,水溶液對維持細胞形態、進行生物化學反應、溫度傳導、調節滲透壓和酸堿度的平衡都有著重要作用。體外培養細胞對水的質量很敏感,要求很高。水的純度不夠,即使混雜有一些含量極微的有害元素,有時也會對細胞產生不利的影響,甚至引起細胞中毒死亡。因此,配制培養液的水必須經過純化。細胞培養實驗室需要純凈的水,常可分為離子交換水和蒸餾水兩種。前者由于仍然帶有非離子物質和有機物,在組織培養中很少使用。組織培養必須使用玻璃蒸餾器制備的三次蒸餾水;二次蒸餾水或外購的金屬蒸餾器制的蒸餾水只能用于清洗器皿,蒸餾水的儲存對保持水的質量有很大影響;周圍環境和空氣能使水污染或改變其pH,所以儲存水的容器要盡量減少啟開的次數,避免和外界過多接觸,存放時間不宜太長,一般不要超過兩周,**好現制現用。二、平衡鹽溶液(balancedsaltsolution,BSS),主要由無機鹽和葡萄糖組成。BSS中的無機離子不僅是細胞生命所需成分,而且在維持滲透壓、緩沖和調節溶液的酸堿度方面,起著重要作用。 平衡鹽溶液DPBS與常規的PBS相比,DPBS 中不含 Ca2+和 Mg2+。江蘇DPBS平衡鹽溶液包括什么
如何選擇細胞平衡鹽緩沖液D-PBS、EBSS、HBSS?甘肅EBSS平衡鹽溶液包括什么
PBS緩沖液,是生物化學研究中使用**為***的一種緩沖液,主要成分為Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl,一般作為溶劑,起溶解保護試劑的作用。由于Na2HPO4和KH2PO4有二級解離,緩沖的pH值范圍很廣,而NaCl和KCl主要作用為增加鹽離子濃度。如有需要PBS還可以補加1 mmol/L CaCl2和0.5 mmol/L MgCl2,以提供二價陽離子。注:PBS不是磷酸緩沖液(phosphate buffer solution,PB)。配置方法:稱取8.0g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4、0.24g KH2PO4溶于800mL蒸餾水中,用HCl調節溶液至7.4,***加蒸餾水定容至1L即可得0.01M PBS緩沖液。甘肅EBSS平衡鹽溶液包括什么