2024-11-21 04:12:23
PBS緩沖液,是生物化學(xué)研究中使用**為***的一種緩沖液,主要成分為Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl,一般作為溶劑,起溶解保護(hù)試劑的作用。由于Na2HPO4和KH2PO4有二級(jí)解離,緩沖的pH值范圍很廣,而NaCl和KCl主要作用為增加鹽離子濃度。如有需要PBS還可以補(bǔ)加1 mmol/L CaCl2和0.5 mmol/L MgCl2,以提供二價(jià)陽離子。注:PBS不是磷酸緩沖液(phosphate buffer solution,PB)。配置方法:稱取8.0g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4、0.24g KH2PO4溶于800mL蒸餾水中,用HCl調(diào)節(jié)溶液至7.4,***加蒸餾水定容至1L即可得0.01M PBS緩沖液。平衡鹽溶液為保持體外細(xì)胞結(jié)構(gòu)和生理完整性提供了良好的環(huán)境。江蘇平衡鹽溶液進(jìn)貨價(jià)
平衡鹽溶液(BalancedSaltSolution,BSS)與細(xì)胞生長狀態(tài)下的pH值、滲透壓等環(huán)境狀態(tài)一致,具有維持滲透壓、控制酸堿平衡、供給細(xì)胞生存代謝所必需的能量和無機(jī)鹽成分等作用,可滿足體外實(shí)驗(yàn)中細(xì)胞生存并維持一定的代謝的基本需要。Leagene平衡鹽溶液(10×BBS)由磷酸鹽、氯化鈉氯化鉀等組成,含Ca2+、Mg2+,不含酚紅,用重蒸超純水配制,pH值7.4,經(jīng)嚴(yán)格過濾除菌處理,內(nèi)***含量低,可用于胰蛋白酶-EDTA細(xì)胞消化液等各種無或低鈣鎂細(xì)胞培養(yǎng)用液的配制以及組織和細(xì)胞的漂洗等,直接使用。江蘇平衡鹽溶液進(jìn)貨價(jià)PBS它對大多數(shù)細(xì)胞是等滲且無毒的。
細(xì)胞培養(yǎng)常用水和平衡鹽溶液的配制方法:水是細(xì)胞賴以生存的主要環(huán)境,營養(yǎng)物質(zhì)和代謝產(chǎn)物都必須溶解在水中,才能為細(xì)胞吸收和排泄。而且,水溶液對維持細(xì)胞形態(tài)、進(jìn)行生物化學(xué)反應(yīng)、溫度傳導(dǎo)、調(diào)節(jié)滲透壓和酸堿度的平衡都有著重要作用。體外培養(yǎng)細(xì)胞對水的質(zhì)量很敏感,要求很高。水的純度不夠,即使混雜有一些含量極微的有害元素,有時(shí)也會(huì)對細(xì)胞產(chǎn)生不利的影響,甚至引起細(xì)胞中毒死亡。因此,配制培養(yǎng)液的水必須經(jīng)過純化。細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室需要純凈的水,常可分為離子交換水和蒸餾水兩種。前者由于仍然帶有非離子物質(zhì)和有機(jī)物,在組織培養(yǎng)中很少使用。組織培養(yǎng)必須使用玻璃蒸餾器制備的三次蒸餾水;二次蒸餾水或外購的金屬蒸餾器制的蒸餾水只能用于清洗器皿,蒸餾水的儲(chǔ)存對保持水的質(zhì)量有很大影響;周圍環(huán)境和空氣能使水污染或改變其pH,所以儲(chǔ)存水的容器要盡量減少啟開的次數(shù),避免和外界過多接觸,存放時(shí)間不宜太長,一般不要超過兩周,**好現(xiàn)制現(xiàn)用。二、平衡鹽溶液(balancedsaltsolution,BSS),主要由無機(jī)鹽和葡萄糖組成。BSS中的無機(jī)離子不僅是細(xì)胞生命所需成分,而且在維持滲透壓、緩沖和調(diào)節(jié)溶液的酸堿度方面,起著重要作用。
(二)Hanks平衡鹽溶液(Hanksbalancedsaltsolutions,HBSS)為了便于保存和減少有關(guān)成分的化學(xué)反應(yīng),此液可配成20倍濃縮液(20×),10倍濃縮液(10×)和5倍濃縮液(5×)的儲(chǔ)存液(母液)。現(xiàn)以l0×為例,將其配制方法介紹如下:×母液配制法甲液:取450ml三蒸水依次溶解下列試劑NaCl80gKCl4gMgS04·(含2H20者)待完全溶解后,補(bǔ)足三蒸水至500m1。乙液:取450m1三蒸水依次溶解下列試劑(含12H2O者),補(bǔ)足三蒸水至500ml。、乙液等量用三蒸水稀釋10倍,即成使用液。用前高壓滅菌。例如配制1000m1Hanks使用液,則取三蒸水900ml加入甲液50m1、乙液50m1混勻,用(115℃)高壓滅菌15分鐘。臨用時(shí),用。3.無鈣鎂Hanks(calciumandmagnesiumfreeHanksbufferedsaline,CMF-Hanks)液,也稱D-Hanks液。D-Hanks與Hanks液的一個(gè)主要區(qū)別是前者不含鈣和鎂,常用于配制胰蛋白酶等溶液;而Hanks液*含,不能用于5%C02的環(huán)境,若放于C02孵箱中,溶液將迅速變酸,使用時(shí)應(yīng)注意D-Hanks與Hanks液的這些區(qū)別。【附】:為配制上述Hanks液,應(yīng)先配好。配制方法如下:稱取,置玻璃研缽中細(xì)研,逐漸加入,要記好加NaOH的量,共加至,將研好的酚磺酞液用吸管移入燒瓶中加三蒸水(113℃)高壓滅菌15分鐘。 平衡鹽溶液可滿足體外實(shí)驗(yàn)中組織、細(xì)胞的生存和代謝的基本需要。
滲透壓平衡和水鹽平衡的定義??:滲透壓平衡是指溶液中溶質(zhì)微粒對水的吸引力達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡的狀態(tài)。水鹽平衡則是指人體內(nèi)水和氯化鈉等無機(jī)鹽的攝入量和排出量達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡,維持體內(nèi)含量相對恒定。?滲透壓平衡的機(jī)制和調(diào)節(jié)過程?滲透壓平衡是通過半透膜兩側(cè)的溶液濃度差異來實(shí)現(xiàn)的。當(dāng)溶液濃度較高時(shí),水分子會(huì)從濃度較低的一側(cè)向濃度較高的一側(cè)移動(dòng),直到兩側(cè)的溶質(zhì)濃度達(dá)到均衡。這種移動(dòng)是通過水分子通過半透膜的擴(kuò)散來實(shí)現(xiàn)的。在體內(nèi),血漿、細(xì)胞內(nèi)液和細(xì)胞外液之間的滲透壓需要保持平衡,以確保細(xì)胞的正常功能和體液的穩(wěn)定。?水鹽平衡的機(jī)制和調(diào)節(jié)過程?水鹽平衡是通過神經(jīng)-體液-內(nèi)分泌網(wǎng)絡(luò)的調(diào)節(jié)來實(shí)現(xiàn)的。下丘腦作為調(diào)節(jié)中樞,根據(jù)體內(nèi)的水和鹽分含量來調(diào)節(jié)抗******的分泌。當(dāng)體內(nèi)水分過多或鹽分過多時(shí),抗******的分泌會(huì)減少,促進(jìn)尿液排出,以恢復(fù)水和鹽分的平衡。這種調(diào)節(jié)機(jī)制確保了體內(nèi)水和鹽分的動(dòng)態(tài)平衡,維持了正常的生理功能。?總結(jié)兩者的區(qū)別?滲透壓平衡主要涉及溶液中溶質(zhì)微粒對水的吸引力達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡的狀態(tài),而水鹽平衡則是指人體內(nèi)水和氯化鈉等無機(jī)鹽的攝入量和排出量達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡,維持體內(nèi)含量相對恒定。滲透壓平衡主要發(fā)生在細(xì)胞內(nèi)外液之間。 HBSS 通常用作細(xì)胞培養(yǎng)基中的緩沖系統(tǒng),有助于維持較佳的生理 pH 值。江蘇平衡鹽溶液進(jìn)貨價(jià)
如何選擇細(xì)胞平衡鹽緩沖液D-PBS、EBSS、HBSS?江蘇平衡鹽溶液進(jìn)貨價(jià)
Hank's平衡鹽溶液(HBSS),含鈣、鎂、酚紅產(chǎn)品簡介平衡鹽溶液(BalancedSaltSolution,BSS)也叫生理溶液(PhysiologicalSolution),是集緩沖液的緩沖力、生理鹽水的等滲性以及培養(yǎng)液的營養(yǎng)供應(yīng)特點(diǎn)于一體的,具有維持滲透壓、保持PH穩(wěn)定以及提供簡單的營養(yǎng)的作用,可滿足體外實(shí)驗(yàn)中組織、***或細(xì)胞的生存和代謝的基本需要。一些平衡鹽溶液中還添加了少量酚紅,用以指示溶液的酸堿度變化。Hank's平衡鹽溶液(Hank'sBalancedSaltSolution,HBSS)是細(xì)胞分離或培養(yǎng)中常用的磷酸鹽緩沖液之一,主要成分包括NaCl、KCl、KH2PO4、Na2HPO4、NaHCO3、CaCl2、MgCl2、MgSO4和葡萄糖。Hank's平衡鹽溶液常用于組織塊的漂洗、細(xì)胞的洗滌、細(xì)胞或組織的運(yùn)輸、其他試劑的配制以及作為細(xì)胞計(jì)數(shù)的稀釋液等。江蘇平衡鹽溶液進(jìn)貨價(jià)